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Os anticorpos são proteínas que o sistema imunológico produz para combater substâncias estranhas. Estas substâncias são frequentemente patógenos (germes causadores de doenças), como vírus e bactérias.

• Com a implementação das vacinas contra o SARS-CoV-2, a detecção e quantificação de anticorpos induzidos pela vacina através dos actuais ensaios comerciais necessita de ser verificada em relação à detecção da imunidade natural após a infecção.
• Esta observação pode ser explicada pela detecção específica de anticorpos direcionados ao RBD no ensaio, uma vez que os anticorpos neutralizantes não RBD não são direcionados nos ensaios sVNT.
• Os testes sorológicos também são utilizados na área forense para identificar grupos sanguíneos ABO, cujos resultados, embora não conclusivos, podem ajudar a excluir ou incluir suspeitos no processo de investigação.

O soro é um componente líquido do sangue composto de água, minerais, diversas proteínas, incluindo albumina, e imunoglobulinas ou anticorpos. A albumina é a proteína pegajosa que dá ao sangue densidade suficiente para que a água contida nele permaneça dentro das paredes das artérias e veias. (A clara do ovo contém altos níveis de albumina, o que lhe confere a consistência característica.) Quando os glóbulos vermelhos e brancos são removidos do sangue, o líquido transparente dourado amarelado resultante é o soro.

O Que Acontece Após O Teste Sorológico?

Os ensaios sorológicos podem ser realizados em vários momentos e o nível de anticorpo determinado. O corpo produz quantidades elevadas de anticorpos para ajudar a combater o antígeno desafiador. Actualmente não há recomendação para o rastreio da imunidade pré ou pós-vacina (88), uma vez que há uma falta de correlação entre a detecção de anticorpos e a imunidade à infecção, e pouco trabalho foi feito para compreender a produção de anticorpos em populações imunocomprometidas. Para compreender que nível de anticorpos pode estar correlacionado com a imunidade contra infecções, são necessários estudos mais aprofundados, incluindo a criação de um padrão internacional que permita a comparação dos níveis de anticorpos entre diferentes vacinas, ensaios e laboratórios. Ensaios de neutralização que utilizam vírus pseudotipados, como o vírus da estomatite vesicular ou sistemas baseados em lentivírus que incorporam a proteína spike do SARS-CoV-2, podem ser usados ​​em laboratórios de nível 2 de biossegurança (64). Um exemplo de um procedimento básico para estabelecer um ensaio de pseudotipo usando partículas de lentivírus envolve a transfecção de uma linha celular de “empacotamento”, como células HEK 293T, com vários plasmídeos para produzir partículas virais seguras e não replicativas que expressam a proteína spike.



Como tal, os testes serológicos clínicos não são recomendados para indivíduos que receberam a vacina contra a COVID-19, especialmente se não estiver disponível um ensaio que detecte anticorpos anti-N. São necessários melhores marcadores do estado imunológico que sejam simples, reprodutíveis e robustos. As verificações de métodos são provavelmente a forma mais comum de avaliação de métodos realizada por laboratórios clínicos atualmente.

Cronogramas De Soroconversão

A cinética dos anticorpos neutralizantes foi consistente com outras infecções virais agudas. Infecções (13), com um pico inicial em 3-4 semanas (magnitude do pico dependente da gravidade da doença) seguido por diminuição dos títulos de anticorpos neutralizantes. Curiosamente, os pacientes com uma dose de pico de infecciosidade elevada mantiveram os títulos de anticorpos neutralizantes por mais tempo em comparação com os pacientes com uma dose de pico de infecciosidade mais baixa.

• Utilizando conjugados anti-IgG ou anti-IgM é possível determinar separadamente as subclasses de imunoglobulinas.
• Consulte seu médico imediatamente se desenvolver sintomas de COVID-19 ou se continuar a apresentar sintomas após a infecção.
• Os métodos de detecção de antígenos são especialmente recomendados no caso de reativação do vírus, por exemplo, para diagnóstico do vírus herpes simplex e varicela zoster, onde a resposta sorológica pode ser muito fraca.
• Como tal, os testes serológicos clínicos não são recomendados para indivíduos que receberam a vacina contra a COVID-19, especialmente se não estiver disponível um ensaio que detecte anticorpos anti-N.
• Atualmente não existem ensaios comercialmente disponíveis para determinar o estado imunológico, que só pode ser avaliado utilizando ensaios PRNT.
• Eles são amplamente utilizados para triagem de produtos sanguíneos quanto ao risco de certas infecções crônicas, avaliação do estado imunológico e necessidade de tratamentos profiláticos em conexão com certos transplantes de órgãos.

Os plasmídeos transfectados incluem um plasmídeo que expressa o repórter, um plasmídeo que codifica o pico SARS-CoV-2 e vários plasmídeos que codificam proteínas lentivirais necessárias para a montagem de partículas virais. Os testes sorológicos são particularmente úteis no diagnóstico de certas doenças bacterianas, parasitárias e virais, incluindo febre maculosa das Montanhas Rochosas, gripe, sarampo, poliomielite, febre amarela e mononucleose infecciosa. Também é útil na detecção de autoanticorpos (anticorpos nocivos que atacam componentes do corpo) que estão envolvidos em doenças autoimunes, como a artrite reumatóide. Como ferramenta prática de rastreio em massa, os testes serológicos revelaram-se valiosos na detecção de doenças como a sífilis, o VIH/SIDA e doenças infecciosas epidémicas e pandémicas (por exemplo, gripe e doença por coronavírus). Impulsionados por interesses de saúde pública, científicos e comerciais, novos testes de diagnóstico para o diagnóstico laboratorial de infecções virais estão continuamente a ser desenvolvidos.

Cobertura De Saúde

A grande variabilidade na forma como a resposta de anticorpos foi medida (ou seja, diferentes ensaios, plataformas, métodos e alvos antigénicos) torna difícil fazer comparações diretas entre estudos. Apesar desta limitação, é claro que nem todos os indivíduos infectados irão desenvolver uma resposta de anticorpos e que o nível de anticorpos pode diminuir com o tempo.

• Embora isto não tenha impacto na tomada de decisão clínica a nível individual, continua a ser uma lacuna crítica na interpretação e utilidade dos testes serológicos do SARS-CoV-2 para estudos de serovigilância.
• Microarranjos simples, legíveis sem bioinformática, reduziriam o custo da triagem sorológica e permitiriam o uso de medidas de controle para melhorar a qualidade dos resultados.
• Fora destes cenários clínicos muito específicos, o papel dos ensaios serológicos é examinar as taxas de prevalência do SARS-CoV-2 com base na população e ajudar a informar as decisões de saúde pública.
• O período de tempo que as respostas de anticorpos persistem, e possivelmente conferem proteção contra reinfecção, é fundamental para a compreensão da dinâmica da infecção por SARS-CoV-2 (o cronograma detalhado para detecção de anticorpos pode ser visto em (9).
• Os testes sorológicos têm uma ampla gama de aplicações na medicina, como testes de imunologia e alergia, diagnóstico de infecções e tipagem sanguínea.

A validação de testes de anticorpos para doenças infecciosas depende frequentemente de estudos destinados a calcular a sensibilidade e especificidade diagnóstica (ou seja, correlacionando a resposta do ensaio a verdadeiros positivos e verdadeiros negativos). As evidências sugerem que a resposta humoral e a soropositividade resultante são afetadas pela gravidade da infecção (presença/ausência de anticorpos detectáveis), pelo tempo desde o início dos sintomas (longevidade dos anticorpos) e pelo antígeno alvo (isótipos de anticorpos e reconhecimento de proteínas virais). Portanto, recomenda-se que os laboratórios clínicos ofereçam ensaios que tenham sido submetidos a uma revisão extensiva por um órgão governamental como a Health Canada ou a FDA, ou por análises de desempenho publicadas e revisadas por pares, quando disponíveis. A exigência é do laboratório clínico para garantir que os ensaios sorológicos sejam usados ​​conforme pretendido e atendam aos padrões de acreditação locais. Com a implementação das vacinas contra o SARS-CoV-2, a detecção e quantificação de anticorpos induzidos pela vacina através dos actuais ensaios comerciais necessita de ser verificada em relação à detecção da imunidade natural após a infecção.

Ensaios De Detecção De Ácido Nucleico

Os testes de tipagem sanguínea consistem na mistura de amostras de sangue com anti-soro A de um lado da lâmina e com anti-soro B do outro lado. Se ocorrer apenas com o anti-soro A, o sangue é do tipo A, ou se ocorrer apenas com o anti-soro B, o sangue é do tipo B. Portadores do gene A que possuem anticorpos contra antígenos B no plasma sanguíneo, e vice-versa, só podem receber transfusões do mesmo tipo sanguíneo ou de sangue tipo O.

• Esses testes ajudam seu provedor a confirmar o diagnóstico de uma ampla gama de doenças, distúrbios e infecções, incluindo COVID-19.
• Os anticorpos SARS-CoV-2 não são detectados de forma confiável menos de 7–21 dias após o início dos sintomas, tornando a sua utilidade no diagnóstico de infecção aguda de valor limitado (2–4).
• No HRP-EIA, o sistema formador de cor consiste em ortofenildiamina (OPD) como cromogênio e peroxidase de hidrogênio (H2O2) como substrato.
• Por outro lado, a presença de anticorpos induzidos pela vacinação pode ser problemática para testes clínicos; por exemplo, no diagnóstico de MIS-C.
• Os rótulos enzimáticos mais comumente usados ​​são peroxidase de rábano (HRP) e fosfatase alcalina (AP).

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